Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Натрия цитрат 3,0 мл
Бромтимоловый синий 0,08 г
Агар 20,0 г
Вода очищенная 1000 мл
Соли растворяют в воде, вносят агар и нагревают до полного его расплавления, значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,2 ± 0,1. Фильтруют через ватно-марлевый фильтр, добавляют 40 мл 0,2 % водного раствора бромтимолового синего.
Среду разливают в пробирку по 5-7 мл.
Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 1210С в течение 15
минут.
При охлаждении скашивают, оставляя столбик 2,0 - 2,5 см.
Среда № 15 (бульон Хоттингера) - для определения индола Раствор гидролизата мяса по Хоттингеру с содержанием амин- 1000 мл
ного азота 120-140 мг %
Натрия хлорид 5,0 г
Калия фосфат двузамещенный 1,0 г
или калия фосфат двузамещенный 3-водный 1,31 г
Гидролизат Хоттингера разводят водой до содержания в среде 120-140 мг% аминного азота, добавляют соли, значение рН доводят таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,5 ± 0,1. Кипятят 15 минут, фильтруют через бумажный фильтр.
Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 1210С в течение 15
минут.
0,9 % раствор натрия хлорида
Натрия хлорид 9 г
Вода очищенная до 1000 мл
Навеску NaCl помещают в мерную колбу на 1000 мл и доводят объем раствора до метки очищенной водой. Раствор фильтруют через бумажный фильтр.
Стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 1210С в течение 15
минут.
Раствор № 1 для промывания мембраны
Пептон ферментативный 1,0 г
Вода очищенная до 1000 мл
рН после стерилизации 7,1 ± 0,2
Раствор № 2 для промывания мембраны
Пептон ферментативный 5,0 г
Твин-80 10,0 г
Вода очищенная до 1000 мл
рН после стерилизации 7,1 ± 0,2
Растворы № 1 и № 2 стерилизуют в паровом стерилизаторе при температуре 1210С в течение 15 минут.
1 % раствор фенолового красного
Феноловый красный 1,0 г
Раствор едкого натра 0,1 моль/л 28,2 мл
Вода очищенная до 100 мл
Навеску индикатора растирают в ступке, прибавляя небольшими порциями едкий натр. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимость 100 мл и доводят объем раствора до метки очищенной водой. Хранят во флаконе нейтрального светозащитного стекла при температуре от 40С до 100С.
0,5 % раствор малахитового зеленого
Малахитовый зеленый 0,5 г
Вода очищенная до 100 мл
Навеску красителя помещают в мерную колбу на 100 мл, доводят объем раствора до метки стерильной горячей водой. Раствор выдерживают сутки в термостате, периодически перемешивая.
Реактив Г рисса
Раствор № 1: 0,5 г сульфаниловой кислоты растворяют в 30 мл ледяной уксусной кислоты, прибавляют 100 мл воды, фильтруют.
Раствор № 2: 0,1 г 1-нафтиламина растворяют в 100 мл кипящей воды, охлаждают, прибавляют 30 мл ледяной уксусной кислоты, фильтруют.
Перед употреблением смешивают равные объемы растворов № 1 и № 2.
Реактив на цитохромоксидазу
Раствор № 1: 1 % спиртовой раствор 1-нафтола.
Раствор № 2: 1 % раствор N, N-диметил-р-фенилендиамина дигидрохлорида.
Перед употреблением смешивают раствор № 1 и № 2 в соотношении 2:3. Реактив Ковача
Спирт амиловый или изоамиловый 75 г
n-диметиаминобензальдегид 5,0 г
Кислота хлористоводородная концентрированная 20 мл
Навеску альдегида растворяют в спирте при легком нагревании (на водяной бане при 50-55 0С), охлаждают и медленно добавляют кислоту.
Раствор должен быть желтого цвета.
Реактив Эрлиха
Спирт этиловый 96 % 95 мл
n-диметиаминобензальдегид 1,0 г
Кислота хлористоводородная концентрированная 20 мл
Навеску альдегида растворяют в спирте и медленно добавляют кислоту.
2.6.14. БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ЭНДОТОКСИНЫ
Испытание на бактериальные эндотоксины проводят для определения наличия или количества эндотоксинов, источником которых являются грамотрица-тельные бактерии, с использованием лизата амебоцитов мечехвоста Limulus polyphemus или Tachypleus tridentatus. Существует три принципа проведения данного испытания: принцип гель-тромба, основанный на образовании геля; турбидимет-рический принцип, основанный на помутнении в результате расщепления эндогенного субстрата; хромогенный принцип, основанный на появлении окраски после расщепления синтетического пептидно-хромогенного комплекса.
